滲透、殺菌雙管齊下
高金噻酮(三代)是我新鄉高金藥業有限公司會同臺灣總部科研人員,在高金噻酮(一代)的基礎上研制的第三代新型**滲透劑。物點表現在新型環保,**滲透,無毒殺菌,雙親型促滲劑,已有的研究結果用應用實踐證明,高金噻酮(三代)不僅具有高金噻酮(一代)的強大的滲透效力,并且對抑制植物病原真菌孢子萌發具有明顯的作用。
通過實驗,高金噻酮(三代)對植物病原真菌分生孢子、孢子囊、菌核等無性繁殖體萌發均有不同程度的抑制作用,特別針對黃瓜霜霉病、馬鈴薯晚疫病、黃瓜黑星病、稻瘟病、蘋果斑點落葉病等病害。不言而喻,抑制病原真菌分生孢子(或孢子囊、菌核)萌發,將在很大程度上控制病害的發生與流行。
有關權威專家評論,高金噻酮(三代)屬于環保實力型滲透劑,滲透、殺菌雙管齊下。從提高殺菌劑滲透性角度解釋,本品極大的提高了殺菌劑對植物葉表組織的滲透力,使藥劑迅速穿過細胞壁,預防病菌原的侵入或殺滅已侵入的病原菌,達到保護植物的目的??膳c任何殺菌劑混用或混配并提高其防治效果。從抑制病原菌孢子萌發角度解釋,本品對多種植物病原真菌孢子都有某種程度的抑制作用,可與各種殺菌劑特別是廣譜性殺菌劑混配,將大幅度提高對病害的防治效果。
高金噻酮(三代)對若干種植物病原真菌孢子萌發的抑制作用
“高金噻酮”(三代)是新鄉高金藥業有限公司研制開發的新型、**、無毒、雙親型促滲劑。已有的研究結果及應用實踐證明,本品與各種農藥,包括殺蟲劑、殺菌劑、除草劑、植物生長調節劑混用,可明顯增強對病、蟲、草害的防治效果并減少農藥使用量??赡鲜∞r科院植保所研究表明,50%多菌靈可濕性粉劑加入1.5%高金噻酮與多菌靈單劑比較,對大葉黃楊白粉病的防治效果可提高1.5倍。一般認為,高金噻酮的增效原理可解釋為,本品極大提高了殺菌劑對植物葉表組織的滲透力,使藥劑迅速穿過細胞壁,預防病原菌的侵入或殺滅已侵入的病原菌,達到保護植物的目的。本研究通過離體(invitro)試驗發現,高金噻酮(三代)對黃瓜霜毒?。≒seudoperonosporacubensis)、馬鈴薯晚疫?。≒hytophthorainfestans)等數種植物病原真菌孢子萌發具有明顯的抑制作用。這一結果為高金噻酮(三代)與殺菌劑復配增效原理提供了新證據,也為高金噻酮(三代)與何種殺菌劑復配防治何種病害更有效提供了生物學信息。試驗結果報告如下:
1.材料與方法
1.1供試藥劑
高金噻酮(三代)有效成份含量99.9%新鄉高金藥業有限公司提供
1.2供試菌種
黃瓜霜霉病Pseudoperonosporacubensis
馬鈴薯晚疫病Phyrophthorainfestans
黃瓜黑心病Cladosporiumcucumerinum
水稻稻瘟病Phyriculariaoryzae
蘋果斑點落葉病Alternariamali
梨黑斑病Alternariakikuchiana
番茄早疫病Alternariasolani
番茄葉霉病Cladosporiumfulvam
水稻紋枯病pelliculariasasakii
油菜菌核病Sclerotiniasclerotiorum
上述菌種除黃瓜霜霉田間采集外,其余均為南開大學元素有機化學研究所保存菌.
1.3供試菌孢子獨得法、孢子懸浮液配制及萌發試驗法
1.31黃瓜霜霉病:田間采集新鮮病葉,清水衛洗后保存于20℃,相對濕潤度100%條件下,24小時后葉背即可產生黑色霉層(孢子囊),用濕毛筆將孢子囊刷至蒸餾水中,玻璃纖維過濾,制成低倍鏡下(10×15)每視野30-50個孢子囊懸浮液.采用“載玻璃片懸滴法”進行孢子萌發試驗。具體操作過程是,將孢子囊懸浮液分別滴加在載玻片上,置于20℃、相對濕度100%條件下,24小時發鏡檢孢子囊萌發率。孢子囊內含物全空或部分空判斷為萌發,孢子囊充滿內含物保持處理狀態視為不萌發。
1.32馬鈴薯晚疫?。簩⒐┰嚲臃N于V-8培養基平板,20℃黑暗培養二周即可形成孢子囊,用濕毛筆將孢子囊刷至蒸餾水中,玻璃纖維過濾,制成低倍鏡下(10×15)每視野30-50個孢子囊懸浮液。采用與黃瓜霜霉病相同的方法進行孢子萌發試驗.
1.33水稻稻瘟病:將供試菌接種于燕麥培養基平板,25℃黑暗培養7-10天,自來水沖洗除去*生菌絲,BLB燈下照射48小時即可產生分生孢子.孢子懸浮液的配制及孢子萌發試驗法與馬鈴薯晚疫病相同.但鏡*時間為處理后12小時,孢子萌發判斷標準;當芽管長度大于孢子短莖1/2時視為萌發.
1.34水稻稻瘟?。簩⒐┰囼灳臃N于PSA培養基平板,25℃黑暗培養一周,自來水沖洗耳恭聽除去氣生菌絲,BLB燈下照射48小時即可產生分生孢子。孢子懸浮液的配制及孢子萌發試驗法均與水稻稻瘟病相同。
1.35蘋果斑點勤務員葉病、番茄早疫病、梨黑斑?。簩⒐┰囼灳臃N于PSA培養基平板,25℃黑暗培養一周,用直徑4mm打孔器打取5枚菌*,置于20ml滅菌水中,混合器振動1分鐘,取其0.1ml置于PSA平板內,用三角玻璃刮刀將菌液涂勻,再置于25℃下cc培養48小時,即可產生分生孢子。孢子懸浮液的配制及孢子萌發試驗法均與水稻稻瘟病相同。
1.36番匣葉霉??;將供試菌用牙簽多點接種于PSA培養基平板,25℃黑暗培養一周,接種即呆擴展成直徑為2-3mm菌團,并含有大量分生孢子。將菌團置于蒸餾水內,混合器振動一分鐘,玻璃纖維過濾,制成孢子懸浮液。調整孢子懸浮液濃度至低倍鏡下(10×15)每視野含30-50個孢子。孢子萌發試驗法與水稻稻瘟病相同。
1.37水稻紋枯病、油菜菌核?。簩⒐┰嚲臃N于PSA培養基平板,25℃培養7-10天,即可形成多數菌核。取出菌核,自來水沖除外圍菌絲,進一步用0.1%升汞水浸泡一分鐘,無菌水漂洗三次,陰干后置于純*酯平板表面,25℃培養48小時,鏡檢菌核萌發情況,由于一個菌核可同時產生數十個芽管,判斷時以完全不產生芽管者視為有效。
1.4藥劑配制及毒力測定法
采用藥劑——孢子懸浮液混合法進行毒力測定。**先將高金噻酮(三代)用少量丙酮溶解,然后用含有250μg·ml-sorporl-144乳化劑孢子懸乳液稀釋至設計濃度,制成一系列含有不同濃度藥劑及相同濃度孢子的混合液。以250μg·ml-sorporl-144乳化劑孢子混合液做空白對照。采用1.3項描述的“載玻片懸滴法”測定不同濃度高金噻酮(三代)對供試菌孢子萌發抑制作用,按下列公式計算孢子萌發抑制率。進一步按濃度對數——抑制率機率值法統計高金噻酮(三代)對供試菌有效中濃度(EC50)。水稻紋枯病、油菜菌核病只做定性觀察,不統計抑制率。
孢子萌發抑率(%)=對照組孢子萌發率-處理組孢子萌發率×100%
對照組孢子萌發率2.結果與分析
高金噻酮(三代)對供試菌孢子萌發的抑制作用試驗結果列于表1。結果表明,高金噻酮(三代)對多數供試菌孢了萌發均有一定程度的抑制作用,其毒力強弱因菌種而異,如表所示,高金噻酮(三代)對黃瓜霜霉病及馬鈴薯晚疫病孢子囊萌發抑制作用*為明顯,EC50分別為12.08、21.24μg·ml-1;其次為黃瓜黑星病、稻瘟病及蘋果斑點落葉病,EC50分別為38.42、43.05、52.46μg·ml-1;再其次為梨黑斑病、番茄早疫病菌及番茄葉霉病,EC50分別為89.50、16.35、119.04μg·ml-1;高金噻酮(三代)對水稻紋枯病菌、油菜菌核病菌抑制作用較弱,但在1000、500μg·ml-1;濃度下也具有100%的抑制作用,200μg·ml-1濃度下雖無抑制作用,但芽管均較下常芽管短且有分枝異?,F象,100、50μg·ml-1濃度無抑制作用。
表1.高金噻酮三代對若干植物病原真菌孢子萌發的抑制作用
3.討論
眾所周知,植物病菌原零點菌的無性凡殖休,如分生孢子、孢子囊、菌核等在病害發生與流行過程中起著十分重要的作用。這些病原體在適宜的環境條件下可作為病害的初侵染來源,導致病害的發生,另一方面,在風、雨、流水等媒介作用下,通過這些凡殖體還可進行再侵染和遠距離傳播,導致病害的暴發與流行。不言而喻,抑制病原菌分生孢子(或孢子囊、菌核)萌發,將在很在程度上控制病害的發生與流行。
本研究發現,高金噻酮(三代)對供試十種植物病原真菌分生孢子、孢子囊、菌核等無性凡殖體萌發均有不同程度的抑制作用。其毒力順序是,黃瓜霜霉病》馬鈴薯晚設病》黃瓜黑星病》水稻稻瘟病》蘋果斑點勤務員葉病》梨黑斑病》番茄早疫病》番茄葉霉病》水稻紋枯?。剑接筒司斯I病。
由于本研究采用的是離體試驗法。因此,高金噻酮(三代)在防治植物病害方面的有效性及程度尚需活體乃至田間試驗驗證。但本研究結果為高金噻酮(三代)提高殺菌劑防病效果的原理提供了新線索。這就是除藥劑本身強大的滲透*力之外,高金噻酮(三代)抑制病原菌孢子萌發,在某種程度上可能發揮了作用,對黃瓜霜霉病、馬鈴薯晚疫病、黃瓜黑星病、稻瘟病、蘋果斑點落葉病害來說,可能發揮著十分重要的作用。
值得注意的是,高金噻酮(三代)抑制作有較強的黃瓜霜霉病、馬鈴薯晚疫病在真菌分類學上均屬卵菌;蘋果斑點落葉病、梨黑斑病、番茄早疫病均屬半知菌的效鏈孢屬,黃瓜黑星病、番茄葉霉病又歸屬相同的Cladosporium;而對抑制作用較弱的水稻紋枯病、油菜菌核病來說,在生活上均不產生無性孢子而以菌核作為無性繁殖體。這種抑制作用強弱與真菌分類是否有某種聯系需進一步研究。
從提高殺菌劑滲透性角度解釋,高金噻酮(三代)可與任何殺菌劑混配并提高其防治效果。從抑制病原菌孢子萌發角度解釋,由于本研究結果表明高金噻酮(三代)對多種植物病原真菌孢子都有抑制作用。因此本品與各種類型殺菌劑特別是廣譜性殺菌劑混配將有助于藥效的發揮。另一方面,由于高金噻酮(三代)對供試菌孢子素養力強弱不完全相同,因此這一結果提示,高金噻酮(三代)與某些特定殺菌劑混用,將有針對性的提高對某種病害的防制效果。本研究為這種混配途徑提供了素養理學依據。